果糖激酶(FRK)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
蔗糖是大多數(shù)高等植物從源到庫(kù)運(yùn)輸?shù)闹饕问? 但進(jìn)入庫(kù)器官后被分解為果糖和葡萄-糖,果糖在進(jìn)入下一步代謝前必須由果糖激酶或己糖激酶進(jìn)行磷酸化,以幫助庫(kù)組織的建立和庫(kù)強(qiáng)的提高,而果糖激酶是催化果糖磷酸化的主要酶。此外,果糖激酶還可以作為植物的己糖感受器和信號(hào)分子,通過(guò)影響植物的生長(zhǎng)周期來(lái)調(diào)控植物的代謝,果糖激酶在庫(kù)組織中發(fā)揮重要的作用。因此,研究果糖激酶對(duì)研究植物中果糖代謝調(diào)節(jié)機(jī)制具有十分重要的意義。
測(cè)定原理:
FRK 催化果糖合成 6-磷酸果糖,6-磷酸果糖在磷酸己糖異構(gòu)酶的作用下異構(gòu)為 6-磷酸葡-萄糖,6-磷酸葡-萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化 6-磷酸葡-萄糖脫氫生成 NADH,NADH 在 340nm 有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 50 mL×1 瓶, 4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 30mL 試劑一充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 7mL 試劑一充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:液體 70μL×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 7mL 試劑一充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。