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ELISA試劑盒的運用步驟

日期:2024-09-20 09:36
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摘要:
  
  1.ELISA試劑盒用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮.
  2.用戶在初度運用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底.
  3.每次試驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4.丈量時先用此孔調(diào)OD值至零.
  4.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,能夠運用蒸餾水和電子天平進行確定(因為蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水能夠看作是lg 200 L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進行確定.
  5.因為底物顯色劑對光及其靈敏,因此要避光保存.
  6.手藝洗板時每次參加洗滌液后.應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干.
  7.檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀翻開,將其預(yù)熱30min以上.
  8.ELISA試劑盒底物為TMB,防止與皮膚相觸摸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量防止觸摸皮膚.
  9.孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格依照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn).
  10.對樣本的結(jié)果有疑問時需要運用其他檢測方法進行驗證.
  11.沒有去離子水或雙蒸水時,能夠運用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿運用自來水.
  12.在運用微量加樣器時,汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使汲取標(biāo)準(zhǔn)品溶液.
  13.汲取液體時速度不易太快,以免發(fā)生氣泡,汲取的量不夠準(zhǔn)確.
  14.將液體加到酶標(biāo)孔中時,防止槍頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會自然流下去.吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔,防止因為槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差.
  15.ELISA試劑盒汲取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差.
  16.試驗前30min將試劑盒中的一切試劑從冰箱取出,使試劑盒中的一切試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只需取出所需量。




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