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標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方法很關(guān)鍵

日期:2024-09-20 07:38
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摘要:標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方 1.光電比色計(jì)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法: 1.1標(biāo)準(zhǔn)液每套四支,其濃度分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L、200gHb/L
標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方法很關(guān)鍵

[包裝規(guī)格]:10ml×8支/盒,根據(jù)血紅蛋白濃度不同,而將氰化高鐵血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L及200gHb/L

標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方
1.光電比色計(jì)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法:
1.1標(biāo)準(zhǔn)液每套四支,其濃度分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L、200gHb/L
1.2用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管,在540nm波長(zhǎng)處用分光光度計(jì)或綠色濾光片的光電比色計(jì)進(jìn)行測(cè)量,調(diào)吸光度(A值)為“0”,再測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)液管,每管測(cè)量3次吸光度(A值),取均值??v坐標(biāo)為吸光度(A值),橫坐標(biāo)為Hb克數(shù)(g Hb/L血液),在標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3用標(biāo)定過(guò)的吸管準(zhǔn)確吸取20μl血液,放入盛有5ml文齊氏液的試管中吸洗三次混勻(251倍稀釋),5分鐘后在同一比色計(jì)上測(cè)定血樣品管的吸光度值(A值),從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出A值相對(duì)應(yīng)血樣品的血紅蛋白克數(shù)(g Hb/L)。
2. 血紅蛋白計(jì)的校正法:
2.1 用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管,將血紅蛋白計(jì)的讀數(shù)調(diào)為“0”值。
2.2 取出空白管,換上單濃度血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)管(100gHb/L、130gHb/L、
150gHb/L),旋轉(zhuǎn)按鈕使血紅蛋白計(jì)的讀數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)管克數(shù)一致。按1.3項(xiàng)方法制備血樣品管并混勻,5分鐘后在同一血紅蛋白計(jì)上測(cè)定,顯示克數(shù)為該血樣品的實(shí)際克數(shù)(g Hb/L)。

組成結(jié)構(gòu)人體內(nèi)的血紅蛋白由四個(gè)亞基構(gòu)成,分別為兩個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基,在與人體環(huán)境相似的電解質(zhì)溶液中血紅蛋白的四個(gè)亞基可以自動(dòng)組裝成α2β2的形態(tài)。血紅蛋白的每個(gè)亞基由一條肽鏈和一個(gè)血紅素分子構(gòu)成,肽鏈在生理?xiàng)l件下會(huì)盤繞折疊成球形,把血紅素分子抱在里面,這條肽鏈盤繞成的球形結(jié)構(gòu)又被稱為珠蛋白。血紅素分子是一個(gè)具有卟啉結(jié)構(gòu)的小分子,在卟啉分子中心,由卟啉中四個(gè)吡咯環(huán)上的氮原子與一個(gè)亞鐵離子配位結(jié)合,珠蛋白肽鏈中第8位的一個(gè)組氨酸殘基中的吲哚側(cè)鏈上的氮原子從卟啉分子平面的上方與亞鐵離子配位結(jié)合,當(dāng)血紅蛋白不與氧結(jié)合的時(shí)候,有一個(gè)水分子從卟啉環(huán)下方與亞鐵離子配位結(jié)合,而當(dāng)血紅蛋白載氧的時(shí)候,就由氧分子頂替水的位置。