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如何選擇ELISA試劑盒的方法
日期：2024-09-20 04:45
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摘要：
一、 原料及制造粗糙的試劑盒
表現(xiàn)在：準(zhǔn)確度不高，重復(fù)性不好。
原因可能為抗體配對(duì)效果不是佳，抗體識(shí)別抗原的表位容易被破壞，包被抗體或檢測(cè)抗體雜蛋白較多，沒有純化或純化效果不好，影響檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度。
客戶辯別檢測(cè)方法：
1.可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子，稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本加入，看檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
2.對(duì)用待測(cè)指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說明書上標(biāo)定的zui小濃度稀釋，可測(cè)出靈敏度，建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測(cè)限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述，也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說。
3.選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù)，可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小，此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對(duì)一些制作較粗糙的試劑盒來說，板間CV值是較大的。
4.如果有相同指標(biāo)的進(jìn)口試劑盒，可用對(duì)方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本，分別加入各自的試劑盒做檢測(cè)，以檢測(cè)試劑盒的真實(shí)性，準(zhǔn)確性。如其中一種是的進(jìn)口試劑盒，比較可靠的話，可作為標(biāo)準(zhǔn)來驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
二、檢測(cè)樣本類型的判斷
目前ELISA試劑盒檢測(cè)的
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一、 原料及制造粗糙的試劑盒
表現(xiàn)在：準(zhǔn)確度不高，重復(fù)性不好。
原因可能為抗體配對(duì)效果不是佳，抗體識(shí)別抗原的表位容易被破壞，包被抗體或檢測(cè)抗體雜蛋白較多，沒有純化或純化效果不好，影響檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度。
客戶辯別檢測(cè)方法：
1.可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子，稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本加入，看檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
2.對(duì)用待測(cè)指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說明書上標(biāo)定的zui小濃度稀釋，可測(cè)出靈敏度，建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測(cè)限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述，也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說。
3.選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù)，可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小，此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對(duì)一些制作較粗糙的試劑盒來說，板間CV值是較大的。
4.如果有相同指標(biāo)的進(jìn)口試劑盒，可用對(duì)方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本，分別加入各自的試劑盒做檢測(cè)，以檢測(cè)試劑盒的真實(shí)性，準(zhǔn)確性。如其中一種是的進(jìn)口試劑盒，比較可靠的話，可作為標(biāo)準(zhǔn)來驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
二、檢測(cè)樣本類型的判斷
目前ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本中，除了細(xì)胞上清外，還有比較大的一部分是血清和血漿樣本，有些試劑盒對(duì)血清和血漿樣本的檢測(cè)效果不好，表現(xiàn)在光值偏低，如RF因子存在的話，光值偏高。
購買產(chǎn)品的實(shí)驗(yàn)者如何分辨呢？
對(duì)說明書上有說能做血清血漿的試劑盒，如有緩沖液。建議如下：用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用分析緩沖液按說明書分別加樣，得出結(jié)果如差異過大，即可得知分析緩沖液的效果如何，是否確實(shí)有作用。
三、試劑盒的選購方法
1.可以對(duì)常規(guī)品種的指標(biāo)，因?yàn)樾枰枯^大，所以國內(nèi)公司會(huì)用心做研發(fā)，一般做的不錯(cuò)，可以用國產(chǎn)的；對(duì)于不常用的指標(biāo)，因?yàn)橛昧可伲瑖鴥?nèi)公司一般不做研，所以會(huì)用國外的。國產(chǎn)和進(jìn)口盒子一起用，節(jié)省經(jīng)費(fèi)而且高。
2.可以咨詢?cè)摴镜募夹g(shù)人員，看看是否專業(yè)。
3.對(duì)其公司要做一個(gè)了解，對(duì)新的公司還要謹(jǐn)慎考慮。
以上是如何選擇ELISA試劑盒方法，您都了解了嗎？