ELISA的質(zhì)控控制

在ELISA的研發(fā)制備中尤為重要的就是它的指控流程，包括抗原設(shè)計(jì)及制備篩選，抗體制備，標(biāo)準(zhǔn)品的定量，檢測液的優(yōu)化，試劑盒的組裝，以及各種性能的驗(yàn)證。對于科研工作者來說，要制備一個(gè)好的ELISA kit，需要具備敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，并且其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便等。下面來看一下ELISA的質(zhì)控控制。

1. 抗原抗體選擇：ELISA檢測原理基于抗原抗體反應(yīng)，其質(zhì)量影響了試劑盒的性能。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：對于標(biāo)準(zhǔn)品定量的準(zhǔn)確性，每個(gè)公司對于定量標(biāo)準(zhǔn)和方法可能會(huì)有不同，這是企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

3. 天然樣本驗(yàn)證分析：我們在選擇樣本時(shí)，避免使用有外源性污染的樣本，避免血樣本出現(xiàn)溶血、污染，使用較新鮮樣本，避免反復(fù)凍融。

4. 陽性及陰性對照：用于評判試劑盒以及當(dāng)次檢測結(jié)果的客觀性和可信性。

5. 特異性：包括交叉反應(yīng)和干擾效應(yīng)，在研發(fā)過程中需消除樣本非特異性引起的假陰性和假陽性。在ELISA試劑盒中為關(guān)鍵抗體一定是經(jīng)過反復(fù)檢測的，不與相關(guān)的類似物反應(yīng)。

6. 靈敏度：此標(biāo)準(zhǔn)可評估試劑盒質(zhì)量優(yōu)良的一個(gè)關(guān)鍵因素，這是由使用的抗體效價(jià)等決定的，在研發(fā)過程中，一般會(huì)優(yōu)化高靈敏度、低背景的檢測結(jié)果從而大大提供試劑盒的靈敏度。

7. 精密度：即為同一樣本重復(fù)測定的符合程度，可分為批內(nèi)精密度和批間精密度。

8. 線性：樣本經(jīng)梯度稀釋后檢測分析即為線性分析，此過程也是用于消除樣本的基質(zhì)效應(yīng)。

9. 回收率：回收實(shí)驗(yàn)可檢測試劑盒是否受干擾因子的影響，也是辨別基質(zhì)效應(yīng)的一種方法。

10. 穩(wěn)定性：即試劑盒在有效期內(nèi)的穩(wěn)定性。

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