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如何完善ELISA？
日期：2024-09-20 04:45
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摘要：1.選擇適合您需求的ELISA方法
ELISA可以通過多種方式進(jìn)行配置，所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面，用抗體進(jìn)行探測，并測量產(chǎn)生的信號。
穩(wěn)健的洗滌技術(shù)是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優(yōu)化洗滌步驟的數(shù)量、持續(xù)時間和體積，以及洗滌緩沖液的去污劑濃度，對于確保去除任何可能影響結(jié)果的未結(jié)合試劑至關(guān)重要。為了獲得更一致的ELISA數(shù)據(jù)。
2.注意標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)曲線對于獲得定量ELISA結(jié)果至關(guān)重要，因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因，用于生產(chǎn)它的參考材料必須是高質(zhì)量的，并且有足夠的數(shù)量，以在分析的整個生命周期內(nèi)實現(xiàn)可重復(fù)的性能。
ELISA數(shù)據(jù)通常以相對于測定讀數(shù)的分析物濃度表示，可以是比色，熒光或化學(xué)發(fā)光。在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)使用更多點(diǎn)（理想情況下為8個或更多）提供了消除異常值的靈活性，并在信號響應(yīng)范圍內(nèi)更好地定義曲線以改進(jìn)擬合。
3.確保可重復(fù)性和準(zhǔn)確性
可重復(fù)性和準(zhǔn)確性對于任何免疫測定都是必不可少的，但當(dāng)定量ELISA 數(shù)據(jù)用于推動關(guān)鍵決策時，要求可能特別嚴(yán)格。
ELISA是一種免疫測定。免疫測定(immunoassay, IA) 是應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)測定標(biāo)本的方法。在檢驗中主要通過抗原抗體反應(yīng)檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。那么如何完善ELISA？
1.選擇適合您需求的ELISA方法
ELISA可以通過多種方式進(jìn)行配置，所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面，用抗體進(jìn)行探測，并測量產(chǎn)生的信號。穩(wěn)健的洗滌技術(shù)是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優(yōu)化洗滌步驟的數(shù)量、持續(xù)時間和體積，以及洗滌緩沖液的去污劑濃度，對于確保去除任何可能影響結(jié)果的未結(jié)合試劑至關(guān)重要。為了獲得更一致的ELISA數(shù)據(jù)。
2.注意標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)曲線對于獲得定量ELISA結(jié)果至關(guān)重要，因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因，用于生產(chǎn)它的參考材料必須是高質(zhì)量的，并且有足夠的數(shù)量，以在分析的整個生命周期內(nèi)實現(xiàn)可重復(fù)的性能。ELISA數(shù)據(jù)通常以相對于測定讀數(shù)的分析物濃度表示，可以是比色，熒光或化學(xué)發(fā)光。在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)使用更多點(diǎn)（理想情況下為8個或更多）提供了消除異常值的靈活性，并在信號響應(yīng)范圍內(nèi)更好地定義曲線以改進(jìn)擬合。
3.確?？芍貜?fù)性和準(zhǔn)確性
可重復(fù)性和準(zhǔn)確性對于任何免疫測定都是必不可少的，但當(dāng)定量ELISA 數(shù)據(jù)用于推動關(guān)鍵決策時，要求可能特別嚴(yán)格。為了額外保證檢測間的重現(xiàn)性，添加另一個內(nèi)部對照來補(bǔ)充標(biāo)準(zhǔn)曲線可提供更大的結(jié)果可信度。作為一般規(guī)則，重復(fù)讀數(shù)的變異系數(shù) (CV) 不應(yīng)超過 20%。
1.選擇適合您需求的ELISA方法
ELISA可以通過多種方式進(jìn)行配置，所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面，用抗體進(jìn)行探測，并測量產(chǎn)生的信號。穩(wěn)健的洗滌技術(shù)是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優(yōu)化洗滌步驟的數(shù)量、持續(xù)時間和體積，以及洗滌緩沖液的去污劑濃度，對于確保去除任何可能影響結(jié)果的未結(jié)合試劑至關(guān)重要。為了獲得更一致的ELISA數(shù)據(jù)。
2.注意標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)曲線對于獲得定量ELISA結(jié)果至關(guān)重要，因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因，用于生產(chǎn)它的參考材料必須是高質(zhì)量的，并且有足夠的數(shù)量，以在分析的整個生命周期內(nèi)實現(xiàn)可重復(fù)的性能。ELISA數(shù)據(jù)通常以相對于測定讀數(shù)的分析物濃度表示，可以是比色，熒光或化學(xué)發(fā)光。在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)使用更多點(diǎn)（理想情況下為8個或更多）提供了消除異常值的靈活性，并在信號響應(yīng)范圍內(nèi)更好地定義曲線以改進(jìn)擬合。
3.確?？芍貜?fù)性和準(zhǔn)確性
可重復(fù)性和準(zhǔn)確性對于任何免疫測定都是必不可少的，但當(dāng)定量ELISA 數(shù)據(jù)用于推動關(guān)鍵決策時，要求可能特別嚴(yán)格。為了額外保證檢測間的重現(xiàn)性，添加另一個內(nèi)部對照來補(bǔ)充標(biāo)準(zhǔn)曲線可提供更大的結(jié)果可信度。作為一般規(guī)則，重復(fù)讀數(shù)的變異系數(shù) (CV) 不應(yīng)超過 20%。