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ELISA實(shí)驗(yàn)中顯色淡,靈敏度偏低的原因

日期:2024-09-20 04:46
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摘要: 1. 試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高;所以盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。 2. 試劑盒未充分平衡;所以試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。 3. 培養(yǎng)箱溫度不足37℃,應(yīng)注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。 4. 保溫時(shí)間不足;所以做實(shí)驗(yàn)時(shí)一定注意時(shí)間的重要性,如果怕忘了時(shí)間,可以校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。 5. 洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加;按說(shuō)明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)。 6. 移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔;所以保證校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔。 7. 蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題,要使用新鮮合格的蒸餾水。
elisa法就是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法的簡(jiǎn)稱。elisa法可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等,是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的定量的實(shí)驗(yàn)診斷方法。其原理是采用抗原與抗體特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接,酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)。在日常實(shí)驗(yàn)中如果遇到顯色淡,靈敏度偏低是什么造成的呢?
 1. 試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高;所以盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。
 2. 試劑盒未充分平衡;所以試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。
 3. 培養(yǎng)箱溫度不足37℃,應(yīng)注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。
 4. 保溫時(shí)間不足;所以做實(shí)驗(yàn)時(shí)一定注意時(shí)間的重要性,如果怕忘了時(shí)間,可以校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。
 5. 洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加;按說(shuō)明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)。
 6. 移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔;所以保證校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔。
 7. 蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題,要使用新鮮合格的蒸餾水。