乳酸含量(LA)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/48S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。
測定原理:
乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時(shí)使NAD+還原生成NADH 和H+,H+傳遞給PMS
生成的 PMSH2 還原 INT 生成紅色物質(zhì),在 530nm 處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。
樣本處理:
1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL
提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,12000g 離心 10min,取上清測定。
2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);于 4℃,12000g 離心 10min,取上清測定。
3. 血清:直接測定。
3.提取物(或者)可配制成一定濃度,如5 mg/mL。
