果糖-6-磷酸果糖激酶(PFK)/6磷酸果糖激酶/果糖6磷酸激酶測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
PFK(EC 2.7.1.11)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,負(fù)責(zé)將果糖-6-磷酸和ATP轉(zhuǎn)化為果糖-1,6二磷酸和ADP,是糖酵解過程的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶之一。
測定原理:
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PFK活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存,臨用前加入2.8mL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20度保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑三:粉劑×1支,4℃保存,臨用前加入260μL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20度保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑四:液體16μL×1支,4℃保存,臨用前加入260μL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20度保存,禁止反復(fù)凍融;