果膠甲酯化程度測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
植物細(xì)胞壁中的果膠是植物初生細(xì)胞壁的主要成分,除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運(yùn)輸?shù)茸饔猛?還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細(xì)胞壁的堅(jiān)韌程度及其抗性。
測(cè)定原理:
果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與 2,4-戊二酮反應(yīng)顯色,在 412nm 下測(cè)定吸光值;同時(shí)半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成 5-甲?；?2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與 3,5-二甲基苯酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在 450nm 下有 吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
試劑組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 6mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 6mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體 4mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑五:粉劑×1 瓶,4℃避光保存;臨用前加入 32mL 試劑六充分溶解待用,用不完的試劑 4℃避光保存。
試劑六:液體 35mL×1 瓶,4℃保存。
試劑七:液體 4mL×1 瓶,4℃保存。
試劑八:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
