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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒

  • 產(chǎn)品型號：50次
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價格：2990
  • 產(chǎn)品庫存：100
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
詳情介紹：
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點： 
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒(Sheep-associated Malignant Catarrhal FeverVirus，SA-MCFV)是一種存在于上皮細胞屑中的病毒，能夠引發(fā)以體表無毛處皮膚痘疹，能夠使上呼吸道、口腔和食管部黏膜形成纖維素性壞死假膜。該病毒對外界是環(huán)境的抵抗力相當(dāng)強，在上皮細胞屑中的病毒，雖然完全干燥和被直射日光作用許多星期，還不致被殺死；加熱至 60℃需經(jīng) 3 小時才被殺死，在-15℃以下的環(huán)境中可保持活力多年。1%的火堿、1%的醋酸或 0.1%的升汞可于 5 分鐘內(nèi)殺死此病毒，較強的抵抗力對羊的健康有巨大的潛在危害，因此羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒的快速準確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本產(chǎn)品就是根據(jù)羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量PCR 產(chǎn)品，
它具有下列特點： 
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：

編號

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL（紅蓋）

試劑二

超純水

1 mL（亮黃色）

試劑三

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒 PCR 引物混合液

100 μL（白蓋）

試劑四

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒 PCR 陽性對照（1×10E8 /μL）

50 μL（黃蓋）

試劑五

使用手冊

1 份

運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品，則需要做N+2個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）： 
3. 對N+2個樣品，在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照，故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分：

成份

N+2 個樣品管

PCR 陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

各 20μL

20μL

20μL

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR 引物混合液

各2μL

2μL

2μL

N+2個樣品DNA模板

各18μL

--

--

PCR 陰性對照（水）

--

18μL

--

PCR 陽性對照（羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR陽性對照1000倍稀釋液）

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程

溫度

時間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)（35 個循環(huán)）

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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