ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中處理血清樣本的注意事項(xiàng)

摘要：在ELISA實(shí)驗(yàn)中，血清是極為常見的樣本，那么在ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中處理血清樣本時(shí)有哪些注意事項(xiàng)呢？今天就跟大家來(lái)介紹一下。 1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清樣本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。 2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免菌體污染，一則菌體?的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些菌體?的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。 3、血清樣本如是以無(wú)菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下。 4、冰凍保存的血清樣本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。樣本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融樣本的混勻亦應(yīng)注意，不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。 5、樣本在保存中如出現(xiàn)菌體?污染所致的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)